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      人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit實驗原理
      點擊次數:1816 更新時間:2010-09-30

      人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit實驗原理


      英文名稱:Human E-Cadherin,E-Cad ELISA 
      1. 采用雙抗體夾心法測定標本中人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit水平。
      2. 首先用純化的人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。
      3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit,再與HRP標記的E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。
      4. 顏色的深淺和樣品中的E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit呈正相關。
      5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出樣品中人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit濃度

      目的:測定人的血清,血漿及相關液體樣本中E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit的含量。

      6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。
      7. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。
      安全性:
      1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
      2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
      3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
      4   Elisa試劑盒請遠離兒童
      自備物品:
      1 、 37 ℃ 恒溫箱
      2 、 標準規格酶標儀
      3 、 精密移液器及一次性吸頭
      4 、 蒸餾水
      5 、 一次性試管
      6 、 吸水紙
       
      保存條件及有效期:
      1.試劑盒保存:;2-8℃。
      2.有效期:6個月
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